细胞复苏的操作步骤
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细胞复苏,生物学的一种术语,是指将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养,细胞恢复生长的过程。操作步骤如下:
1、实验员戴上防护眼镜打开液氮罐,将冷冻管从液氮中取出,迅速投入37℃水浴融化,在水浴中时用镊子夹住细胞冻存管并在水浴中不时晃动。
2、细胞融化后,在1分钟内将冷冻管移出。
3、拿酒精棉球擦拭冷冻管外部杀菌消毒,晾干后放置在水浴上。
4、开启瓶盖后把细胞转入含有4mL培养基的培养瓶中,然后把培养瓶移至培养箱,36℃~38℃培养1小时,让细胞贴壁。
5、细胞贴壁后,小心移弃培养基,加5mL新鲜培养基,在36℃~38℃中培养。
6、细胞培养24小时后,更换新鲜培养基,继续培养直到形成单层。
7、详细记录复苏细胞的名称、数量、复苏时间、存放部位等。细胞复苏全程注意无菌操作。
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