MTT法检测细胞活性的原理是什么
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MTT法是常用的一种细胞活性检测方法,其原理是通过将MTT荧光染料作用于细胞内,利用细胞内活性代谢产物还原MTT荧光染料为紫色杂质,通过检测杂质吸光光谱来判断细胞的存活率和代谢活力。检测时,步骤一般包括细胞处理、加入MTT染料、细胞还原MTT荧光染料、溶解细胞、吸光度检测等。
1、细胞处理:将需要检测的细胞培养在含有试验物质的培养基中,或者将不同条件下的细胞分别处理。
2、加入MTT染料:在细胞培养基中加入一定浓度的MTT荧光染料,MTT荧光染料会穿透细胞膜进入细胞内部。
3、细胞还原MTT荧光染料:MTT荧光染料在细胞内被代谢酶还原为紫色的杂质。
4、溶解细胞:加入溶剂将细胞溶解,同时将还原后的紫色杂质溶解在细胞培养基中。
5、吸光度检测:使用酶标仪检测细胞溶液的吸光度,MTT染料还原产生的紫色杂质的吸光值与细胞的存活率和代谢活力成正比。通过检测MTT还原后紫色产物在570-630 nm范围内的吸光值,计算细胞活性和细胞存活率。
MTT法通过检测紫色杂质吸光光谱来推断细胞存活率和代谢活力,是一种便捷、直观、快速的细胞学检测方法,建议患者选择正规的医疗机构进行这项检测。
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